典型案例一例猪圆环与猪副嗜血杆菌混合

一例猪圆环与猪副嗜血杆菌混合感染的病例

江苏省泰州某规模化养猪场，年10月，保育猪出现营养不良、关节肿大、下痢，皮肤出现出血斑或渗出性皮炎等症状。送检两头活的病猪至江苏检测中心，经确诊为副猪嗜血杆菌、猪圆环病毒Ⅱ型混合感染。

1.1临床情况

保育猪在80-90日龄发病，出现精神沉郁，食欲下降，呼吸困难，跛行等症状，部分保育猪全身皮肤苍白且呈皮炎症状，覆盖淡红色小丘疹，有死亡。

1.2剖检症状

打开胸腹腔，发现大量黄色心包积液，肺脏大部分肉变，只有一小部分呈现正常颜色，肺脏表面覆盖一层白色的纤维素样渗出物，心肌增厚，腹腔大量积液，脾脏有出血点，边缘有锯齿状突起，大肠出现出血斑，肠上有丝状的纤维性渗出物。见图（1、2）

图3肺脏肉变、有纤维性渗出物

2实验室诊断方法

对病猪进行细菌分离，采集猪病料进行病原检测，分别检测了猪圆环病毒2型（PCR方法）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（RT-PCR方法）、猪瘟病毒（RT-PCR方法）。

2.1细菌学诊断方法

2.1.1细菌的分离培养

无菌采集病猪肺脏、心包积液，接种于于TSA平板（胰蛋白大豆琼脂培养基）（添加5%犊牛血清，0.%NAD），倒置于5%CO2培养箱中，37℃培养24h-48h，观察结果。

2.1.2细菌的生化鉴定

挑取分离纯化的细菌分别在鲜血琼脂平板上与金黄色葡萄球菌交叉划线和在鲜血琼脂平板上单独划线，鉴别溶血性和NAD依赖性。

2.1.3细菌的药物敏感实验

用无菌棉签蘸取分离菌TSB培养液，均匀涂布于含NAD的TSA平板，用无菌镊子将药敏纸片平贴于培养基的表面，置于5%CO2培养箱37℃培养24h，观察结果。

2.2病原检测

取病猪肺脏、淋巴结（病变明显部位），加生理盐水充分研磨后反复冻融3次，提取组织中的RNA，应用RT-PCR分别扩增猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒。

3实验室诊断结果

3.1细菌分离结果

TSA平板接种的细菌，置于5%CO2培养箱37℃培养24h，可见圆形、隆起、湿润、表面光滑、边缘整齐、灰白色的小菌落，大小约0.5～2mm,挑取菌落涂片，革兰氏染色后镜检为革兰氏阴性菌，菌体形态多样从单个的球状到长的、细长的，甚至丝状的菌体（图4、5）。

3.2药敏试验结果

分离菌对头孢吡肟、卡那霉素和氟苯尼考、替米考星、环丙沙星均敏感；对其它药物分离菌株均低度敏感或者不同程度耐药，药敏结果见表1

表1分离菌药敏实验结果

3.3抗原检测结果

经过检测，圆环抗原检测为阳性，猪瘟、蓝耳、伪狂犬均阴性。抗原检测结果见图6。

图6圆环抗原检测阳性

4分析

根据临床症状、剖检变化和实验室诊断结果，确诊该厂病猪为猪圆环病毒2型和副猪嗜血杆菌混合感染。副猪嗜血杆菌（HPS）对营养要求高，初次分离培养需要供给V因子（NAD），置于5%的CO2环境下培养。从临床病料中分离该菌常常不能成功，很难确诊该病。

当猪群中存在PRRSV或PCV2时，更易继发感染副猪嗜血杆菌病，成功分离该菌的机率会增加，提醒各位养殖户在怀疑该病发生时，禁止滥用抗生素，及时送至实验室进行细菌分离培养和药物敏感实验。治疗药应该以正确的药物敏感实验结果为准，选择敏感药物进行治疗。

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