病原性球菌检验之葡萄球菌属

一

葡萄球菌属

　　（一）生物学特1.形态与结构 　　本属细菌革兰染色阳性，呈圆球形，直径0.5～1.5μm，不规则排列，形似葡萄串状，在脓汁或液体培养基中，可呈单个、成对或短链排列。无鞭毛和芽胞，某些菌株能形成荚膜。

2.培养特性 　　需氧或兼性厌氧，营养要求不高。最适pH为7.4，最适温度为35～37℃。在普通琼脂平板上经37℃24～48h培养，可形成圆形、凸起、表面光滑湿润、边缘整齐、不透明菌落，直径为2～3mm。可产生不同的脂溶性色素，如金黄色、白色、柠檬色色素。葡萄球菌可产生α、β、γ和δ溶素。 　　在液体培养基中生长迅速、呈均匀混浊状。

3.生化反应本属菌触酶试验阳性，多数能分解葡萄糖、麦芽糖及蔗糖，产酸不产气。致病性葡萄球菌一般能分解甘露醇产酸、液化明胶和产生血浆凝固酶。

4.抗原 　　葡萄球菌的抗原包括蛋白抗原和多糖抗原。 　　（1）蛋白抗原：为完全抗原，有种属特异性。存在于葡萄球菌的表面，具有抗吞噬作用，称葡萄球菌A蛋白（SPA）。 　　（2）多糖抗原：是半抗原，具有型特异性。

　　协同凝集试验

5.分类 　　（1）《伯杰系统细菌学手册》（）据DNA及表型特征等将葡萄球菌分为19个种。继之，各国学者又从人和动物中检出数种凝固酶阴性葡萄球菌新种，共27种。 　　（2）古典分类法：根据其产生色素的不同分为金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌和柠檬色葡萄球菌。年，葡萄球菌国际分类委员会将葡萄球菌分为凝固酶阳性与凝固酶阴性葡萄球菌（CNS），凝固酶阳性葡萄球菌主要为金黄色葡萄球菌。CNS常包括表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌。6.抵抗力 　　对理化因素抵抗力强，耐热，耐干燥，耐高盐，是抵抗力最强的无芽胞细菌。

　　（二）致病性1.侵袭性疾病⑴皮肤及软组织感染，如毛囊炎、疖、痈等；⑵全身性感染，如败血症、脓毒血症、骨髓炎、心内膜炎、脑膜炎等；⑶呼吸道感染，如支气管肺炎、肺炎、脓胸等；⑷医院内感染。2.毒素性疾病①食物中毒，急性胃肠炎；②烫伤样皮肤综合征；③中毒性休克综合征；④葡萄球菌性肠炎。

　　（三）检验方法及鉴定 　　（1）直接镜检：无菌取脓汁、痰、渗出物和脑脊液（离心后取沉渣）涂片，经革兰染色后镜检，如为革兰阳性球菌呈葡萄串状排列可初步报告为：“查见革兰阳性葡萄状排列球菌，疑为葡萄球菌”。 　　（2）分离培养：血液标本（静脉血约5m1）注入50ml葡萄糖肉汤或含硫酸镁肉汤增菌培养，置35℃，一般于24h后若出现混浊，溶血及胶冻状生长，则接种于血琼脂平板，进一步鉴定，若无细菌生长，于48～72h后（一般以7天为限），接种血琼脂，以确定有无细菌生长。

脓汁、尿道分泌物、脑脊液可直接接种血琼脂平板。35℃18～24h，可见直径2～3mm，产生不同色素的菌落。金黄色葡萄球菌在菌落周围有透明的溶血环。 　　尿液标本，必要时作细菌菌落计数（CFU/ml）。 　　粪便、呕吐物接种高盐甘露醇琼脂平板，经35℃18～24h培养，可形成细小菌落，48h后形成典型菌落。

　　（3）鉴定试验①触酶试验：细菌产生的过氧化氢酶催化H2O2生成水和氧气。方法：取营养琼脂上的菌落置于洁净试管内或洁净玻片上，滴加3%H2O2溶液数滴，观察结果，如立即（1min内）有大量气泡产生为阳性，不产生气泡为阴性。葡萄球菌属为触酶阳性。②血浆凝固酶试验：血浆凝固酶是金黄色葡萄球菌所产生的一种与其致病力有关的侵袭性酶，分游离型和结合型两种。其作用是使血浆中的纤维蛋白在菌体表面沉积和凝固以阻碍吞噬细胞的吞噬。 　　可分别用试管法和玻片法检测。玻片法用于粗筛，若玻片法为可疑或阴性结果，还需用试管法确证。

③甘露醇发酵试验。④新生霉素敏感试验：凝固酶阴性的葡萄球菌的鉴别，采用新生霉素敏感试验。一般新生霉素耐药者多为腐生葡萄球菌，敏感者为表皮葡萄球菌。金黄色葡萄球菌：触酶试验阳性、血浆凝固酶试验阳性、甘露醇发酵试验阳性、对新生霉素敏感。表皮葡萄球菌：触酶试验阳性、血浆凝固酶试验阴性、对新生霉素敏感。腐生葡萄球菌：触酶试验阳性、血浆凝固酶试验阴性、对新生霉素耐药。 　　报告：检出“XXX葡萄球菌”。

　　（5）临床意义：葡萄球菌感染的特点是感染部位组织的化脓、坏死和脓肿形成。金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌是引起临床感染最常见的葡萄球菌。①金黄色葡萄球菌常引起疖、痈、外科伤口、创伤的局部化脓性感染，播散入血后可引起深部组织的化脓性感染。此外，其产生的肠毒素可引起食物中毒，表现为急性胃肠炎。主要致病物质有血浆凝固酶、葡萄球菌溶素、杀白细胞素、肠毒素、表皮溶解毒素和毒性休克综合征毒素等。②表皮葡萄球菌是存在于皮肤的正常栖居菌，由于各种导管植入和人造组织的使用，医院感染的重要病原菌，它是导致血培养污染的常见细菌之一。③腐生葡萄球菌可导致尿路感。

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